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小鼠肾成纤维细胞

简要描述:尚恩生物依托国际化的*技术及多年专业化的原代细胞分离培养经验,能够为您提供高品质的原代细胞、原代细胞提取物定制服务。集结丰富经验的人才,并配备了整套实验设备,全程自主研发,严控开发流程,保障产品质量,紧抓售后服务,可以提供高质量的小鼠肾成纤维细胞。已与国内外多家科研单位、药企、以及医院等建立了良好的合作关系,成为生物医药行业的诚信伙伴和坚强后盾。

  • 产品型号:SNP-M143
  • 厂商性质:生产厂家
  • 更新时间:2023-06-14
  • 访  问  量:588
详细介绍
品牌其他品牌货号SNP-M143
规格T25瓶供货周期现货
主要用途实验应用领域生物产业

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---尚恩生物 ---

一、细胞基本属性

货号:SNP-M143

产品名称:小鼠肾成纤维细胞

物种:小鼠

组织来源:肾组织

细胞简介:该细胞分离自肾组织;肾脏是机体的重要器官,它的基本功能是生成尿液,借以清除体内代谢产物及某些废物、毒物,同时经重吸收功能保留水份及其他有用物质,如葡萄糖、蛋白质、氨基酸、钠离子、钾离子、碳*氢*等,以调节水、电解质平衡及维护酸碱平衡。肾脏同时还有内分泌功能,生成肾素、促红细胞生成素、前列腺素、激肽等,又为机体部分内分泌激素的降解场所和肾外激素的靶器官。肾脏的这些功能,保证了机体内环境的稳定,使新陈代谢得以正常进行。成纤维细胞(Fibroblast)是疏松结缔组织的主要细胞成分,由胚胎时期的间充质细胞分化而来。成纤维细胞较大,轮廓清楚,多为突起的纺锤形或星形的扁平状结构,其细胞核呈规则的卵圆形,核仁大而明显。成纤维细胞功能活动旺盛,细胞质嗜弱碱性,具明显的蛋白质合成和分泌活动,在一定条件下,它可以实现跟纤维细胞的互相转化;成纤维细胞对不同程度的细胞变性、坏死和组织缺损以及骨创伤的修复有着十分重要的作用。肾成纤维细胞是肾脏结缔组织中最重要的细胞类型,在体外培养中,一般大致成梭形、多角形或不规则形等,为贴壁生长型细胞。刚分离的肾成纤维细胞呈圆形、折光性良好,悬浮于培养基中。30min细胞贴壁,其中部分开始伸出伪足,表现为小的突起;6h后细胞基本贴壁*,伸展成梭形,胞核清晰,分布较均匀,散在生长,不聚集成团;细胞生长迅速,5-7天即呈融合状态,细胞排列紧密,有的交叉重叠生长,平坦、胞体较大,细胞质透明,细胞核较大,呈椭圆形,颜色淡。细胞融合,并彼此连接成网状;细胞呈突起的纺锤形或星形的扁平分布。其主要功能有:①组成过滤屏障内壁的重要部分;②在炎症和致血栓物质的刺激合成必要的生物活性分子;③受损后影响系膜细胞和上皮细胞,进而影响肾脏病变。

方法简介:采用胰蛋白M-胶原M混合消化法结合差速贴壁法制备而来,细胞总量约为5×10^5cells/瓶。

配套体系:成纤维体系

发货形式:T25瓶(1×106左右)

规格:5×10^5cells/T25瓶

培养条件:具体培养条件详询尚恩生物细胞培养技术专员

培养环境:37℃,5%二氧化碳

我们推荐使用尚恩生物小鼠肾成纤维细胞专用*培养基(产品货号:SNPM-M143)作为体外培养的培养基。


二、细胞培养操作

换液周期2-3天
培养基体积T25瓶10-12ml;10cm皿12-15ml
传代比例1:2-1:4(具体情况视细胞生长速度及密度决定)
传代方法1.尽量吸干净T25瓶原培养基;
2.加3-4ml 常温PBS轻轻润洗细胞10-20s,吸走润洗的PBS;
3.T25瓶加1ml左右胰M,轻轻晃动培养瓶以使胰M铺匀瓶底细胞层;
4.将培养瓶放入37度培养箱消化;
5.消化到细胞间隙变大,但未*脱落时加2-3ml*培养基终止胰M消化;
6.混匀细胞,900rpm离心3-5min,弃上清;
7.加新的*培养基轻轻重悬细胞,均匀分到新的培养瓶里;
8.补足*培养基,将培养瓶放回培养箱静置培养;
注意事项不同品牌胰M消化时间差别较大,注意严格控制消化时间

消化传代细胞时吹打细胞注意尽量轻柔,不要产生过多气泡以免影响细胞状态。


三、细胞冻存操作
冻存液配方92%FBS+8%DMSO(新手推荐)或92%*培养基+8%DMSO(高手推荐);
冻存规格200-300万/ml,1ml每管
冻存方法1.消化并离心获得细胞沉淀后,加配置好的冻存液轻轻重悬细胞;
2.将细胞悬液尽快移入已经做好标记的冻存管;
3.将冻存管转入程序冻存盒,放入-80度冰箱过夜,第二天转入液氮保存;没有程序冻存盒的实验室,加入细胞后可以将冻存管放在泡沫盒中4度静置5-10min,再-20度静置2h后转入-80度过夜,第二天转入液氮保存

注意事项冻存细胞转入液氮后及时复苏一管检查细胞冻存活性,若有异常,及时调整实验方案


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