AtT-20（小鼠垂体瘤细胞）

一、细胞基本属性
细胞名称:AtT-20（小鼠垂体瘤细胞）
细胞别称:AtT20; AtT 20; ATT-20
细胞货号:SNL-239
细胞种属:小鼠
生长情况:聚团悬浮
培养条件:F12K+15%HS＋2.5%FBS+1%双抗
培养环境:air, 95%; carbon dioxide (CO2), 5%
二、细胞培养操作
换液周期:2-3天
培养基体积:T25瓶10-12ml；10cm皿12-15ml
传代比例:1:2-1:4（具体情况视细胞生长速度及密度决定）
传代方法:
1.轻轻吸走培养上清，留2-3ml培养基轻轻吹打细胞面吹下细胞；
2.混匀细胞，收集细胞培养基，900rpm离心3-5min，弃上清；
3.加新的*培养基轻轻重悬细胞，均匀分到新的培养瓶里；
4.补足*培养基，将培养瓶放回培养箱静置培养；
注意事项；半贴壁细胞会附着瓶底，但贴壁不紧，轻轻吸取培养基轻轻吹打细胞面就会脱落，不需要胰m消化。建议使用培养皿培养，更适合吹打细胞操作，吹打细胞注意尽量轻柔，不要产生过多气泡以免影响细胞状态。
三、细胞冻存操作
冻存液配方：92%FBS+8%DMSO(新手推荐)或92%*培养基+8%DMSO(高手推荐);
冻存规格：200-300万/ml，1ml每管
冻存方法：
1.消化并离心获得细胞沉淀后，加配置好的冻存液轻轻重悬细胞；
2.将细胞悬液尽快移入已经做好标记的冻存管；
3.将冻存管转入程序冻存盒，放入-80度冰箱过夜，第二天转入液氮保存；没有程序冻存盒的实验室，加入细胞后可以将冻存管放在泡沫盒中4度静置5-10min，再-20度静置2h后转入-80度过夜，第二天转入液氮保存
注意事项：冻存细胞转入液氮后及时复苏一管检查细胞冻存活性，若有异常，及时调整实验方案
Tips：
细胞悬浮生长，大部分聚集成葡萄串状生长，太大团块应及时吹散避免中央细胞营养不足死亡，小团块无需处理。

我们推荐使用尚恩生物AtT-20（小鼠垂体瘤细胞）*培养基（产品货号：SNLM-239）作为体外培养的培养基。