293细胞是指来源于人类胎肺紧序细胞的一系列细胞株,具有广泛应用于生物医学研究和生产的潜力。这些细胞起源于1973年从人类胎肺提取的一种胎儿肺腺瘤细胞。经过多年的培养和传代,这些细胞株获得了一定的稳定性和一致性。特点是其对病毒的易感性。研究者利用这些细胞株,可以选择性地导入不同的质粒或病毒,从而实现对相关蛋白的大规模表达和功能研究。此外,可以通过高效而稳定的转染技术,用于大规模制备重组蛋白和病毒颗粒。
293细胞的存储措施:
1.培养基:常用的培养基为DMEM高糖培养基,通常添加10-15%的胎牛血清(FBS)作为生长因子。培养基必须去除菌液,并且在4℃保存。
2.培养室条件:需要在无菌的培养室中培养。一般情况下,培养室的温度应保持在37℃,湿度约为95%,并且气体控制为5%CO2和95%空气。此外,应定期对培养室进行消毒,以保持无菌环境。
3.细胞传代:当达到80-90%的密度时,需要进行传代来保持细胞的正常生长。传代时,使用无菌的PBS缓冲液洗涤细胞,然后使用0.25%胰蛋白酶-EDTA溶液将细胞从培养瓶中剥离,并用新的培养基重新分装。
4.细胞检测:为了确保纯度和生长状态,应定期对细胞进行检测。可以使用显微镜观察细胞形态,或者进行细胞活力检测和染色体核型分析。
5.避免污染:污染是众多细胞培养实验中常见的问题,因此必须采取措施确保不受细菌、真菌和病毒等污染。遵循无菌实验操作程序,并对培养器具、试剂和培养基进行严格的消毒和清洁。
6.储存和保存:可以在液氮中冷冻保存。在进行冷冻保存时,应使用适当的冻存液,快速冷冻并储存于-80℃或更低温度。在保存期间,需要定期检查和更换培养条件,以确保冻存细胞的存活率。