bv2细胞是小鼠的小胶质细胞

　　bv2细胞是小鼠小胶质细胞，用于测试这些小儿HGG细胞激活小胶质细胞肿瘤支持表型的能力，是组蛋白H3野生型并表达大量的H3K27的三甲基化形式，以及其乙酰化形式。可以观察到DIPG肿瘤是由H3-K27M阳性和阴性的细胞混合组成的，H3K27me3和H3K27ac的表达水平不一样。对三个不同DIPG患者的肿瘤组织进行的免疫组化分析证实，DIPG癌细胞为H3-K27M阳性，而其微环境中表达IBA1的小胶质细胞不携带该突变。我们表明，与它们的组蛋白H3状态无关，即不论是野生型H3还是H3-K27M突变型，小儿HGG细胞都能够使BV2小胶质细胞向肿瘤支持型极化，这表现在它们能够支持HGG癌细胞对基质的入侵能力。
 

　　接下来，我们检查了一氧化氮合酶-2（Nos2）基因的表达，因为其表达的诱导与小胶质细胞的促炎症表型有关，而其表达在暴露于胶质瘤被大幅抑制。胶质瘤细胞甚至可以有效地减少LPS诱导的小胶质细胞中NOS2的表达。因此，通过抑制Nos2基因的表达进一步说明了小胶质细胞肿瘤支持表型的获得，该基因编码诱导型一氧化氮合酶，是小胶质细胞极化为免疫抑制和促进肿瘤激活状态的分子特征。
 

　　在bv2细胞中对H3K27me3和乙酰化H3K27（H3K27ac）富集的染色质免疫沉淀（ChIP）进行了分析。事实上，Nos2启动子上的H3K27me3数量明显减少，这反映了一个转录更活跃的基因位点。同时，与siCtrl相比，在siEzh2小胶质细胞中观察到H3K27ac的富集，这与更高的转录激活有关，尽管并不明显。接下来，我们调查了有效的抗肿瘤细胞因子ll1b的表达，发现在与H3.3野生型SF188肿瘤细胞、H3-K27M SF8628或第二个患者衍生的DIPG细胞系SU-DIPG-XIII共培养时，这种细胞因子在小胶质细胞中没有被诱导然而，我们发现siEzh2小胶质细胞表达的Il1b水平升高，即使与SF188肿瘤细胞共培养，Il1b水平仍保持不变。为了进一步证实Il1b可能是H3K27me3的重要靶点，我们用炎症源脂多糖(LPS)治疗siEzh2小胶质细胞。