小鼠原代细胞中的呼吸道上皮细胞系大多来源于肿瘤组织或成系时与肿瘤细胞融合,其生物学行为与正常呼吸道上皮细胞差异较大。为更准确反映呼吸道疾病条件下该类细胞的生物学效应,对小鼠呼吸道上皮细胞分离的新技术和培养方法进行了探索。利用链霉蛋白酶消化法分离获得小鼠呼吸道上皮细胞,利用特殊的*培养基和I型胶原包被的培养皿进行原代培养。
镜下可观察到呼吸道上皮细胞的纤毛节律性的定向摆动,细胞较完整地保留了其原有生理功能。分离技术和培养方法简单、稳定、有效、可靠,为研究呼吸道疾病的细胞模型创造了条件。同时,此法可为其它实验动物呼吸道上皮细胞的培养提供借鉴。
小鼠原代细胞形态观察:原代组织块培养一般3d后组织块周围有生长晕出现,且逐渐向周围扩展,单层细胞3d后已贴壁生长。结果:光镜下可见培养的肝细胞呈三角形、圆形、类圆形或扁平不规则多角形,排列整齐,细胞界限清晰,胞浆丰富透亮,细胞中有核,有单核、双核,呈圆形或椭圆形,核仁清晰。细胞紧密相连成单层膜,细胞增殖数量增多时,整块上皮膜随之移动,处于上皮膜边缘的细胞多与膜相连,很少脱火焰状或旋涡状走行,胞质向外伸出2-3个长短不同的突起。
小鼠原代细胞是指来源活体组织,经特定分离方法制备而成的初始细胞。原代细胞离体时间短且不经过永生化过程,其生物学特性未发生很大变化,仍保持原有的遗传特征,可更好地反映细胞在体内的生长状态,从而获得与体内生理功能更接近的数据。