在培养贴壁细胞的时候,偶尔会出现细胞接种后贴壁不均匀的情况。有的地方长得非常密集,有的地方却太稀疏。虽然这对于常规培养并不算大问题,但有时则可能影响后续的实验进程。
所以一旦遇到贴壁不匀,建议排查原因并优化操作方案。
本文中,小尚将细胞贴壁不均匀总结归纳为四种情况:
1. 局部生长密集,密集处呈不规则分布
l 原因:一般是接种时没有混匀,或者细胞传代时没有消化彻di从而形成细胞团块导致的
l 解决方案:继续培养1-2天,待细胞状态稳定后,重新消化接种,接种时注意使用十字法或8字法混匀,接种后显微镜下确认细胞是否分散为单个细胞。
2. 培养器皿中央生长密集,边缘稀疏
l 原因:十字法或8字法混匀时摇晃次数过多,液体形成漩涡所导致
l 解决方案:继续培养1-2天,待细胞状态稳定后,重新消化接种。在混匀时摇晃5-6次即可。
3. 细胞在培养器皿的半边生长,形成明显分界线
l 原因: 这可能是培养箱架子不平造成的
l 解决方案:可通过调节培养箱架子以保持水平解决。
4. 细胞形成同心圆,并靠边缘生长
l 原因:这是由于培养箱风扇故障或设备震动导致
l 解决方案:在培养器皿下面垫泡沫板或在架子上放重物可以有所缓解,检查培养箱风扇是否正常运转。
总之,细胞贴壁不均匀可能是多种因素造成的,对于前两种情况,一般是传代操作造成的,重新接种即可解决;而后两种情况是硬件设施造成的,则需要调试设备。
同学们如果有遇到其他贴壁不均匀的情况,可以在下方评论区留言哦。
扫一扫,关注公众号
©2024 武汉尚恩生物技术有限公司 版权所有 备案号:鄂ICP备2020018368号-2 技术支持:化工仪器网 Sitemap.xml 总访问量:134465 管理登陆