选择合适的Vero细胞应该考虑品牌声誉、供应商支持、细胞来源、细胞状态和存储条件等因素,以确保所购买的细胞能够满足您的实验需求和研究目的。是种常用的猴肾细胞系,在细胞学研究和生物制品制备中广泛应用。
1.品牌选择:是种非常常见的哺乳动物细胞系,因此市面上有许多不同品牌供应。
-供应商支持和服务:选择提供良好售后支持和技术服务的供应商,以便在使用过程中获得帮助和解决问题。
2.细胞源选择:来源于非洲绿猴肾细胞,国内外供应商提供来自不同的细胞库或资源。在选择细胞源时,可以考虑以下因素:
-原始材料的质量和纯度:确保细胞源的纯度和质量,以避免可能的污染或混杂。
-细胞文化特性:了解供应商提供的细胞的适用范围、表型特点等,以确保其适合您的研究目的。
3.细胞状态选择:在购买时,可以选择冻存细胞、传代细胞或已经培养的细胞。这取决于您的实验需求和实验计划。
-冻存细胞:保存在液氮中的细胞,需要解冻复苏后才能使用。
-传代细胞:已经经过了几代的细胞,可以直接用于培养和实验。
-已培养的细胞:已经培养和扩增的细胞,可以直接用于实验。
4.细胞存储条件:存储条件非常重要,可以根据供应商提供的存储建议来选择合适的细胞。
-存储温度和条件:通常,冻存细胞应该保存在液氮中,传代细胞和已培养的细胞则应该在低温下保存,如-80°C。
-存储液体:根据供应商的建议,使用适当的细胞保存液保存细胞,以确保其保存质量和稳定性。
5.可能的应用:可以用于各种实验应用,如病毒培养、病毒传染性研究、免疫学研究等。在购买细胞时,可以参考供应商提供的相关应用信息,以确定其适用性和可靠性。
Vero细胞的操作使用步骤:
1.使用含有DMEM(Dulbecco'sModifiedEagleMedium)培养基,加入10%胎牛血清(FBS)、青霉素和链霉素的混合物(浓度分别为100U/ml和100μg/ml)。
2.将Vero细胞从液态氮中取出,迅速用37℃预热的培养基解冻,加入培养基后轻轻混匀。
3.细胞密度达到80-90%时,将细胞从培养瓶中用0.25%胰蛋白酶-EDTA进行消化,停止消化后加入培养基,通过离心收集细胞沉淀,用适量培养基稀释,然后转移到新的培养瓶中。
4.将培养瓶放入37℃、5%CO2的细胞培养箱中,每2-3天更换一次培养基。
Vero细胞的维护保养方法:
1.每2-3天更换一次培养基,当培养基变黄或有明显的酸味时应立即更换。
2.细胞密度不宜过高,细胞达到80-90%密度时进行传代以避免细胞过度增殖。
3.细胞应保持正常的增殖状态,定期观察细胞的形态,并用显微镜检查细胞的污染情况,如有污染应立即处理。
4.当需要长时间保存Vero细胞时,可将其冻存于液态氮中。冻存前应将细胞培养至稳定生长期,使用1mL培养基和1mL二甲基亚砜混匀,将混合液添加至细胞培养瓶中,然后迅速转移到液态氮中。