大鼠视网膜神经节细胞细胞简介:
大鼠视网膜神经节细胞分离自视网膜组织得到,视网膜居于眼球壁的内层,是一层透明的薄膜。视网膜色素上皮层与脉络膜紧密相连,由色素上皮细胞组成,它们具有支持和营养光感受器细胞、遮光、散热以及再生和修复等作用。组织学上视网膜分为10层,由外向内分别为:色素上皮层、视维、视杆细胞层、外界膜、外颗粒层、外丛状层、内颗粒层、内从状层、神经节细胞层、神经纤维层、内界膜。视网膜上的感觉层是由三个神经元组成。第一神经元是视细胞层,专司感光,它包括锥细胞和杆细抱。视杆细胞主要在离中心凹较远的视网膜上,而视维细胞则在中心凹处最多。第二层叫双节细胞,约有10到数百个机红胞通过双节细胞与一个神经节细胞相联系,负责联络作用。第三层叫节细胞层,专管传导。视网膜是一层菲薄的但又非常复杂的结构,它贴于眼球的后壁部,传递来自视网膜感受器冲动的神经纤维跨越视网膜表面,经由视神经到达出口。视网膜神经节细胞贴壁后呈单层排列,部分细胞聚集成团,细胞呈圆形或椭圆形,核圆且相对透明,有些细胞膜上伸出短而小的突起:该细胞为高度分化细胞,在体外属于不增殖群。视网膜神经节细胞是青光眼病理性损害的主要细胞,视网膜神经节细胞的死亡可导致视功能不可逆损伤。
大鼠视网膜神经节细胞培养操作:
1.尽量吸干净T25瓶原培养基;
2.加3-4ml 常温PBS轻轻润洗细胞10-20s,吸走润洗的PBS;
3.T25瓶加1ml左右胰M,轻轻晃动培养瓶以使胰M铺匀瓶底细胞层;
4.将培养瓶放入37度培养箱消化;
5.消化到细胞间隙变大,但未脱落时加2-3ml培养基终止胰M消化;
6.混匀细胞,900rpm离心3-5min,弃上清;
7.加新的培养基轻轻重悬细胞,均匀分到新的培养瓶里;
8.补足培养基,将培养瓶放回培养箱静置培养。