随着实验室细胞培养的发展,除了原代培养之外,还将建立开发或获得众多的细胞系。每一个细胞系均扩大了其起源细胞的应用,成为有价值的资源。若该细胞系颇为*,则其可能是不可替换的;替换至少也是昂贵与耗时的。因此,必须通过保存细胞系来保证这种重要投资。
由于培养早期传代培养的选择,有限细胞系的衰老以及连续细胞系的遗传和表现不稳定性,使细胞系在连续培养时有变异倾向。
此外,即使在管理好的实验室中也有可能发生仪器故障和污染。交叉污染以及错误辨识的发生率也很高。因此,存在诸多理由进行冷冻储存细胞,总体概述有几大不得不冻存细胞的理由:
①由于遗传不稳定性而导致基因漂移;
②衰老,最后导致细胞系消失;
③生长特性的转化以及恶性相关特性的获得;
④由于选择和去分化导致表型的不稳定性;
⑤微生物污染;
⑥其他细胞系的交叉污染;
⑦由于操作粗心而导致的错误鉴别;
⑧孵育箱故障;
⑨对于保存那些不立即使用的细胞系,可节省时间和材料;
⑩需要将细胞系转给其他使用者。
在考虑冻存细胞之前,需满足以下特定条件:
01
确认冻存前需证实细胞系未受污染,且确为该细胞系。尽管对于新获得的细胞系,可以在*确认前冻存几支,但在大量冻存前应进行*确认。
冻存时间,如果是有限细胞系,这些细胞应经5代倍增生长,获得足够量的细胞再进行冻存。连续细胞系应将其克隆化,选择特征性的克隆,待生长至足够数量再进行冻存。连续细胞系有其优势:它们可无限生长,生长比较迅速,容易克隆,但是它们缺乏遗传稳定性。有限细胞系通常或接近二倍体。在一定传代水平间是稳定的,但是,它们很难克隆,生长缓慢,最终死亡或发生转化。
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公司介绍
武汉尚恩生物技术有限公司坐落于武汉东湖区光谷生物城,专注于细胞及系列产品的研发、生产和服务,公司建有标准化GMP实验室、动物房,已整体通过ISO 9001:2015质量管理体系认证,获得企业、3551人才、瞪羚企业、科技小巨人等多项荣誉。
公司主要研发生产细胞系、原代细胞、胎牛血清、基础培养基、*培养基、辅助试剂等系列产品,提供细胞及培养配套产品一站式采购;细胞库冻存细胞系500余种,同时通过不间断引种细胞扩大丰富细胞种类;公司还提供人源细胞系的STR鉴定、大小鼠的种属鉴定服务等。
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