胎牛血清应取自剖腹产的胎牛;新牛血清取自出生24小时之内的新生牛;小牛血清取自出生10-30天的小牛。显然,胎牛血清是品质*高的,因为胎牛还未接触外界,血清中所含的抗体、补体等对细胞有害的成分*少。
1、性状、外观 浅黄色澄清、无溶血、无异物稍粘稠液体。
2、蛋白质含量 3.5%~5.0%( w/v)
3、血红蛋白含量 ≤ 0.02%( w/v)
4、无菌检验 阴性
5、支原体检验 阴性
6、细菌内毒素 ≤5(EU/ml)
7、牛腹泻病毒 阴性
8、大肠杆菌噬菌体 阴性
9、支持细胞增殖(Sp2/0-Ag14) 生长曲线(接种浓度)*大增殖浓度≥2.5×106 个/ml细胞倍增时间 ≤15h克隆率 ≥85%。
胎牛血清(Fetal Bovine Serum ,FBS) 是在屠宰怀孕母牛的时候,通过心脏穿刺采血获取的胎牛的血清,新生牛(小牛)血清(Calf serum, CS)采自出生10至14 天的小牛。
其次,组份与比例不同:两者所含的促细胞生长因子、促贴附因子、激素及其他活性物质等组份与比例不同,用途与用法不同:某些细胞必需胎牛血清才能生长,而有些细胞只需小牛血清即可,使用浓度不同,一般在5%-10%,有特殊要求的浓度在20%。
血清保存和使用须注意:血清应保存在-5℃至-20℃,若存放在4℃不可超过一个月。解冻血清时 ,应先将血清至于2-8℃冰箱,并经常摇匀使之溶解,然后至室温放置使之升温,不可将冷冻的血清直接放入37℃水浴或者温箱中,如放在37℃解冻,颜色加深,粘稠度也会增加,血清在解冻和热灭活后,应按用量分装并于-20℃保存,避免反复冻融。
胎牛血清,小牛血清和新生牛血清三种之间的区别:这三种血清的成份,总体没有什么明显差别,只是有一些成分与其生存环境有关,如上述有人说的抗体很等少。此外,因生长发育的需要,有些成分在小牛出生后会发生一些变化。不过还没有搞清楚它与其它的血清之间的差别。有一点可以肯定,胎牛血清中的部分功能蛋白与小牛血清中的含量有差别。
重要的一点是,胎牛本身生活在一个洁净环境当中,其血清与外界隔绝,只要生产工艺科学规范,其质量肯定要比后两者好。
根据牛出生时间和血清采制分离方法分为:
1、胎牛血清:八月龄胎牛心脏穿刺取血;
2、新生牛血清:出生12-24小时新生牛静脉采血;又可细分为:a.**新生牛血清:采血后静置自然析出的血清;b.标准新生牛血清:c.经离心分离的血清;d.普通新生牛血清:融血或微融血的血清;
3.小牛血清:出生三月龄小牛动脉采血分离血清;
血清是血浆去除纤维蛋白而形成的一种很复杂的混合物,其组成成份虽大部分已知,但还有一部分尚不清楚,且血清组成及含量常随供血动物的性别、年龄、生理条件和营养条件不同而异。血清中含有各种血浆蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生长因子、激素、无机物等,这些物质对促进细胞生长或抑制生长活性是达到生理平衡的。对血清的成分和作用的研究虽有很大进展,但仍存在一些问题。
胎牛血清是品质*高的,因为胎牛还未接触外界,血清中所含的抗体、补体等对细胞有害的成分少。
一般选用血清种类可以根据ATCC及实验需要来选择。其实,除了一些比较娇贵的细胞,如干细胞之类的,其余的大部分细胞培养,用国产的足以!而且MRC品牌血清之类的口碑也颇好,性能也比较稳定,所以很多实验室都在用。