原代细胞的培养应用及分离注意事项

　　原代细胞培养的应用：
 

　　1、为研究生物体细胞的生长、代谢、繁殖提供有力的手段；
 

　　2、为传代培养创造条件；
 

　　3、服务于临床实践，用于药物筛选等。
 

　　原代细胞培养之分离注意事项：
 

　　组织块培养法：
 

　　1)组织块接种后的前3天，在观察和移动的过程中，注意不要引起液体的振荡。要避免经常翻动和振动，否则组织块不易附着于瓶壁上或附着后也会脱落飘起。
 

　　2)加入的培养液不宜过多，避免浸泡的组织块受轻微的波动而脱落下来。
 

　　3)当细胞向外迁徙出来后要注意记录并去除漂浮的组织块和残留的细胞，它们产生的有毒物质会影响原代细胞的生长。
 

　　4)为促进组织块尽快粘贴在培养瓶皿上，可以在种植前先将胶原薄层涂在培养瓶底壁上。
 

　　原代细胞与细胞系有什么区别？
 

　　根据传统定义，自组织第一次收获和接种的细胞被称为原代细胞 [Freshney, R.I. (1987). Culture of Animal Cells. A Manual of Basic Technique. (New York, Alan R. Liss, Inc.)]. 这类细胞直接从组织分离，生命周期有限，经数次传代后会逐渐停止生长。原代细胞在有限的生命周期内需掌握好细胞的最大生长空间，以保持细胞群中基因型和表型的一致性。
 

　　细胞系是不断生长、分化的细胞群，因其经过遗传改造，致使其具有无限增长的潜能。体外生长的细胞系用于医疗或科研。
 

　　但实际上，经过长时间、连续的传代培养后，细胞系随着代数的增加，细胞的基因型和表型都有可能发生改变。
 

　　需要指出的是，在不同的科研小组中这些术语的定义会有所不同。许多研究员不用细胞系这个词表示细胞群，除非细胞经过了遗传改造。