胎牛血清应用在哺乳动物细胞培养中,应用很广泛。比如,能够用在科研、工业生产、人兽疫苗生产的质量控制及生物技术药物的质量控制领域。血清是血液凝固后的液体部分,不含血细胞、纤维蛋白及凝集因子等,含有多种对细胞生长需要的营养因子及大分子物质。血清白蛋白是血清主要成分。此外,重要的是,胎牛血清中含有大量对细胞生长需要的生长因子,也含有一些小分子物质,如氨基酸、糖类、脂类及激素类物质。
胎牛血清采血:
1、挑选出大约8月龄以上的健康妊娠母牛,经剖腹获取小牛。
2、将小牛清洗干净后,侧放在万级洁净房间内的采血台上,固定四肢及头部。
3、用来苏水清洗心脏外部,刮去心脏外部牛毛,露出心脏外部一侧皮肤,用2%碘酒擦拭消毒。
4、在心脏部位切开一道10厘米左右的切口,取出近心血管,先用2%碘酒消毒,再用75%的酒精消毒,用止血钳夹住血管,切开1厘米左右的切口进行插管,插好管后打开血管的止血钳,让牛血顺采血管流入另一个洁净房间内的采血瓶中。
5、采血瓶采血前经干烤灭菌(180℃2小时)后,按无菌操作注入10毫升左右经高压灭菌的生理盐水后加塞封口,于采血前半小时放入37℃恒温箱备用。采血前先晃动瓶内生理盐水,使其充分湿润瓶壁后倒出,再进行采血并加塞封口。将采血后的采血瓶放37℃恒温室2小时,再放入4℃冷库4小时以备离心。
胎牛血清的常规处理方式是热钝化,即放在56°水浴30分钟;其目的是使血清中的补体成分及一些未知的细胞生长抑制分子失活。热钝化处理过程需要小心谨慎,因为血清中的生长因子容易在较高温度或者较长时间加热条件下失活,甚至产生沉淀。Gamma照射能够对胎牛血清进行灭菌处理。常规的灭菌方法是多次透过0.1um的滤膜以消除微生物污染,而gamma照射能够钝化牛群中常见的病毒。但是,一些类型的病毒能够抵抗gamma照射,比如细小病毒。