磷酸盐缓冲液使用中的注意事项:
不少缓冲溶液都含有易挥发组分,如,氨-氯化铵中的氨酷酸-醋酸钠中的醋酸。现在,不少实验室引入了定量加液器,用定量加液器加试剂,具有简便准确误差恒定的特点,特别是在做成批样品时更显出它的*性,不少同志也喜欢用它来加缓冲液,但是,应注意缓冲液不能长久存放在定量加液器中,因该器皿不密闭,易造成氨的挥发(醋酸-醋酸钠缓冲液中的醋酸也同理),从而,导致溶液失效,正确的做法是缓冲液应适量配制,使用后及时密闭并置于低温中保存。
当往某些溶液中加入一定量的酸和碱时,有阻碍溶液pH变化的作用,称为缓冲作用,这样的溶液叫做缓冲溶液。而磷酸盐缓冲液是生物化学研究中使用较为广泛的一种缓冲剂,因为它们是二级解离,有二个pKa值,所以用它们配制的缓冲液。
磷酸盐缓冲液优点:
① 容易配制成各种浓度的缓冲液;
② 适用的pH范围宽;
③ pH受温度的影响小;
④ 缓冲液稀释后pH变化小,如稀释十倍后pH的变化小于0.1。
缺点:
① 易与常见的钙Ca2+离子、镁Mg2+离子以及重金属离子缔合生成沉淀;
② 会抑制某些生物化学过程,如对某些酶的催化作用会产生某种程度的抑制作用。
在实际工作中有些分析人员由于不大了解磷酸盐缓冲液的作用机理,当所配制和使用的缓冲溶液与规定的数值不相符时,为使缓冲溶液达到要求,就用盐酸或氢氧化钠等强酸、强碱进行调节, 以为这样做可以使缓冲溶液尽快达到所需要的pH值,然而,结果却适得其反,这样的溶液pH值虽然调对了,可是它的缓冲体系却被破坏了,作用也就失去了,缓冲溶液一般都是由弱酸及其弱酸盐或是弱碱及其弱碱盐组成的一对共轭体。